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DNA末端粘轉(zhuǎn)平試劑盒

點(diǎn)擊次數(shù):16  發(fā)布時(shí)間:2025/5/30

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公司名稱:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 型 號(hào): 生產(chǎn)地址:中國大陸 已獲點(diǎn)擊:16 簡單介紹: DNA末端粘轉(zhuǎn)平試劑盒,本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治/療,非藥用,非食用。
詳細(xì)內(nèi)容
產(chǎn)品名稱:DNA末端粘轉(zhuǎn)平試劑盒
產(chǎn)品英文名稱:DNA Blunting Kit
產(chǎn)品分類:分子生物學(xué)試劑
純度/規(guī)格:30T
保存:-20℃,有效期1年。

產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品利用Pfu DNA polymerase所具有3′到5′的聚合酶活性和5′到3′外切酶活性,將3′或5′突出的DNA---pian段轉(zhuǎn)化成平末端,用于克隆工作。

產(chǎn)品特點(diǎn):
1.簡單,精心優(yōu)化過的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要單獨(dú)準(zhǔn)備。
2.適用于任何平末端的DNA載體。

使用方法:
1. DNA---pian段的準(zhǔn)備:
無論是來源Taq,Tth,T7,Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA---pian段,還是用限制性內(nèi)切酶制備的DNA---pian段,粘轉(zhuǎn)平之均需要將DNA沉淀以便去除反應(yīng)液中的無關(guān)成份。沉淀DNA的方法包括經(jīng)典的鹽/純沉淀法,離心柱DNA 吸附法和百奧萊博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 設(shè)置粘轉(zhuǎn)平(Polishing)反應(yīng):
在一個(gè)干凈的離心管中,分別加入
3′或5′突出的DNA---pian段    10-500ng
2×Polishing Buffer    25μL
Pfu DNA polymerase    1μL
補(bǔ)水到    50μL
72℃保溫2小時(shí)。

注意:如果不使用熱蓋式PCR 儀器加熱,則需要在反應(yīng)管中再加入適量液體石蠟以防反應(yīng)過程中水份蒸發(fā)。
3.反應(yīng)后處理
粘轉(zhuǎn)平反應(yīng)后,樣品可以放-20℃長期保存,也可以直接用于T4 DNA連接酶催化的連接反應(yīng)。對(duì)10μL的連接反應(yīng)體系,一般需要加入1-2μL粘轉(zhuǎn)平反應(yīng)液。由于Pfu DNA polymerase在連接反應(yīng)的溫度條件下幾乎沒有活性,所以不必去除。但文獻(xiàn)報(bào)道,去除后連接效率更高。



因產(chǎn)品貨期價(jià)格有變動(dòng),請(qǐng)與客服確認(rèn)后再下單!謝謝理解!
我司所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治/療,非藥用,非食用。



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