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技術(shù)文獻

rtpcr和實時熒光定量pcr實驗區(qū)別分析
閱讀次數(shù):46 發(fā)布時間:2024/6/12 9:56:02
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  rtpcr和實時熒光定量pcr區(qū)別如下:

1、所說的PCR應(yīng)該就是常規(guī)的PCR,以DNA為模板,通過上下游引物,實現(xiàn)DNA的擴增。

2、RT-PCR一般情況下是指反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription),盡管有些資料上說實時熒光定量PCR也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也簡稱RT-PCR,但是這是不對的,不推薦。

基本操作過程是將所提取的RNA進行反轉(zhuǎn)錄,然后將所獲得的cDNA作為模板,設(shè)計引物進行擴增,是一種檢測基因表達的常用方法。

3、實時熒光定量PCR也就是Real-Time PCR,其/大的作用是檢測樣品中的初始DNA濃度。

至于三者的關(guān)系,RT-PCR和實時定量PCR應(yīng)該都屬于PCR,在RNA實驗中,這二者都會應(yīng)用到。

例如你要比較2個組織中的某基因的表達差異,先你要提取2個組織的總RNA,然后通過RT-PCR檢測該基因是否在2個組織中有表達,然后通過實時定量PCR測定該基因在2個組織中的表達量是否具有顯著性差異。


rtpcr和實時熒光定量pcr區(qū)別如下:

1、所說的PCR應(yīng)該就是常規(guī)的PCR,以DNA為模板,通過上下游引物,實現(xiàn)DNA的擴增。

2、RT-PCR一般情況下是指反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription),盡管有些資料上說實時熒光定量PCR也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也簡稱RT-PCR,但是這是不對的,不推薦。

基本操作過程是將所提取的RNA進行反轉(zhuǎn)錄,然后將所獲得的cDNA作為模板,設(shè)計引物進行擴增,是一種檢測基因表達的常用方法。

3、實時熒光定量PCR也就是Real-Time PCR,其/大的作用是檢測樣品中的初始DNA濃度。

至于三者的關(guān)系,RT-PCR和實時定量PCR應(yīng)該都屬于PCR,在RNA實驗中,這二者都會應(yīng)用到。

例如你要比較2個組織中的某基因的表達差異,先你要提取2個組織的總RNA,然后通過RT-PCR檢測該基因是否在2個組織中有表達,然后通過實時定量PCR測定該基因在2個組織中的表達量是否具有顯著性差異。

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